改良Lowry法蛋白定量試劑盒文章資料

改良Lowry法蛋白定量試劑盒

產品簡介：

目上常用的蛋白濃度檢測方法是：BCA蛋白定量試劑盒(BCAProteinAssayKit)和Bradford蛋白定量試劑盒(BradfordProteinAssayKit)。改良Lowry法蛋白定量試劑盒是利用蛋白中肽鍵與銅離子結合成四配位基銅離子復合物，后者與Folin試劑(福林酚)反應，產生藍色比色物，用分光光度法(酶標儀或分光光度計)檢測750nm處吸光度，并與標準曲線比較，求得待測蛋白樣品的濃度，在1～1500μg/ml濃度范圍內有較好的線性關系。

組成：

根據樣品數量按照試劑(A):Folin-CiocalteuReagent：ddH2O=1:1的比例配制工作液現配現用

儲存條件：

12個月有效。

改良Lowry法蛋白定量試劑盒 操作步驟（僅供參考）：

1、取適量10mg/ml蛋白標準，稀釋至終濃度為1500μg/ml或所需濃度。如取150μl 10mg/ml蛋白標準，加入850μl稀釋液，充分混勻，即配制1500μg/ml蛋白標準。

2、根據樣品數量，按試劑(B1):試劑(B2):試劑(B3)=50:1:1的比例配制改良LowryReagent工作液，充分混勻。

3、將1500μg/ml蛋白標準用稀釋待測樣品的溶液5倍梯度稀釋，濃度分別為300μg/ml、60μg/ml、12.5μg/ml、2.5μg/ml、0μg/ml，各取40μl加到96孔板的標準品孔。

4、加待測蛋白樣品或稀釋液(空白對照)到96孔板的樣品孔中，如果標準品稀釋液與溶解待測蛋白樣本的溶液不同，應在待測蛋白樣本孔中加入40μl稀釋液；如果標準品稀釋液與溶解待測蛋白樣本的溶液相同，無需在待測蛋白樣本孔中加入40μl稀釋液。

5、用多通道微量移液器快速將200μl配置好的改良LowryReagent工作液加入至各孔，立即在96孔板混勻器上混勻30s或手動輕輕混勻。室溫準確孵育。

6、用多通道微量移液器快速將20μl新鮮配置的Folin-Ciocalteu工作液加至上述各孔中，立即在96孔板混勻器上混勻30s或手動輕輕混勻30s。

7、輕輕混勻96孔板，酶標儀或微量滴定板讀數儀測定750nm處吸光度，也可用分光光度計測定，但應考慮根據比色皿的小檢測體積，檢測樣品數量亦相應減少。

注意事項：

1、蛋白標準原液中含有防腐劑，不影響后續檢測，該蛋白標準原液-20℃保存。

2、待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中，否者待測蛋白與蛋白標準中所含非蛋白成分不一致，有可能導致測定不準確。

3、如果沒有酶標儀，也可以使用普通的分光光度計測定，但應考慮根據比色皿的小檢測體積。

4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5、本產品僅供科研使用，嚴禁它用。

     標簽：蛋白定量試劑盒 試劑盒 本生試劑盒 試劑A

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