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    如何確保ELISA實驗的重復性?

    更新時間:2025-12-24    點擊次數:95

      如何確保ELISA實驗的重復性?

      一、標準品處理與加樣規范

      標準品處理?:凍干標準品需用配套稀釋液復溶,渦旋混勻后梯度稀釋(如640pg/ml至0pg/ml),避免反復凍融?。

      加樣規范?:

      使用校準移液器,加樣時吸頭貼壁45°緩慢注入,避免氣泡和液體掛壁。

      控制加樣速度(5分鐘內完成),復孔間誤差<5%?。

      二、孵育控制與洗滌優化

      孵育控制?:37℃恒溫孵育,封板膜密封防止蒸發,震蕩儀輔助混勻?。

      洗滌優化?:

      洗滌液現配現用(1:20稀釋),每孔注滿后靜置30秒,重復5次。

      拍干時避免殘留,邊緣孔需重點檢查?。

      三、封閉加強與試劑平衡

      封閉加強?:1% BSA或明膠封閉1.5小時,減少非特異性結合?。

      試劑平衡?:

      試劑盒室溫平衡15-30分鐘,底物避光保存。

      酶標板開封后密封袋保存,防止受潮?。

      四、樣本處理與移液校準

      樣本處理?:

      血清樣本離心后分裝,避免反復凍融;高濃度樣本需預稀釋。

      溶血或脂血樣本需超濾處理?。

      移液校準?:每月校準移液器,加樣前檢查密封性?。

      五、溫育記錄與批次管理

      溫育記錄?:使用定時器控制孵育時間,避免人為誤差?。

      批次管理?:

      不同批次試劑禁止混用,標記開瓶日期。

      質控樣本(如陽性對照)每板必設?。

      通過以上措施可顯著提升ELISA實驗的重復性,確保結果穩定可靠。

      注:本產品僅供科研使用,不作為實驗依據。具體操作請以實際試劑盒說明書為準。

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